在重組蛋白(bái)生(shēng)産過程中(zhōng)，生(shēng)物(wù)污染一(yī)直是一(yī)個不容忽視的問題。生(shēng)物(wù)污染的來源多種多樣，細菌、真菌、支原體(tǐ)、病毒等生(shēng)物(wù)污染會造成嚴重的藥品質量事件，威脅用藥患者生(shēng)命安全。因此，對已生(shēng)産的藥品或正在生(shēng)産的藥品，我(wǒ)(wǒ)們要盡量準确的檢測其中(zhōng)的微生(shēng)物(wù)與病毒的生(shēng)物(wù)負荷，避免受到污染藥品流入市場。
漢騰生(shēng)物(wù)擁有1200+㎡的GMP質量控制實驗室，擁有國際一(yī)流的先進設備，具備符合ChP, USP, EP等藥典要求的檢測能力，滿足全面的數據可靠性要求。
漢騰生(shēng)物(wù)重組蛋白(bái)生(shēng)産平台擁有自主開(kāi)發的高表達CHO細胞株構建平台，為客戶提供專業的雙抗特異性抗體(tǐ)（BsAb）和重組蛋白(bái)生(shēng)産服務。
漢騰生(shēng)物(wù)車(chē)間生(shēng)産工(gōng)藝流程圖
整個生(shēng)産過程中(zhōng)，原材料（生(shēng)物(wù)來源），細胞庫（主細胞庫，工(gōng)作細胞庫），未加工(gōng)原液物(wù)料（生(shēng)物(wù)反應器收獲前），下(xià)遊工(gōng)藝的适當階段，原液等需要進行微生(shēng)物(wù)限度檢測，以确認各工(gōng)序中(zhōng)微生(shēng)物(wù)負荷在規定範圍内。
藥品生(shēng)産過程中(zhōng)有關産品的微生(shēng)物(wù)控制類型主要包括無菌檢測、微生(shēng)物(wù)限度檢測和支原體(tǐ)檢測。
無菌檢測
無菌檢查法系用于檢查藥典要求無菌的藥品、生(shēng)物(wù)制品、醫療器械、原料、輔料及其他品種是否無菌的一(yī)種方法。若供試品符合無菌檢查法的規定，僅表明了供試品在該檢驗條件下(xià)未發現微生(shēng)物(wù)污染。無菌産品的最終放(fàng)行需遵循各國法規，《中(zhōng)國藥典》2020版1101無菌檢測法，USP-NF <71> STERILITY TESTS，EP 2.6.1，JP 4.06均對産品無菌檢測進行了規定，其中(zhōng)《中(zhōng)國藥典》2020版在無菌檢查方面的要求，完善了滅菌法和無菌檢查用隔離(lí)系統的驗證及應用。
無菌檢測的方法主要包括直接接種法和薄膜過濾法兩種：
微生(shēng)物(wù)限度檢查
本法适用非無菌産品的微生(shēng)物(wù)限度檢測，檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染。防止污染的措施不得影響供試品中(zhōng)微生(shēng)物(wù)的檢出。潔淨空氣區域、工(gōng)作台面及環境應定期進行監測。如供試品有抗菌特性，應盡可能去(qù)除或中(zhōng)和。
微生(shēng)物(wù)限度的檢測，《中(zhōng)國藥典》2020版1105&1106&1107，USP-NF <61> &<1111>，EP 2.6.12&5.1.4等對非無菌産品微生(shēng)物(wù)限度檢查進行了詳細規定，其中(zhōng)《中(zhōng)國藥典》2020版明确了半固體(tǐ)制劑的微生(shēng)物(wù)限度标準，半固體(tǐ)制劑與液體(tǐ)制劑一(yī)樣應從嚴控制。
非無菌産品微生(shēng)物(wù)限度檢測的方法主要包括平皿法、薄膜過濾法和MPN法三種：
支原體(tǐ)檢測
2020版《中(zhōng)國藥典》3301 支原體(tǐ)檢查法中(zhōng)規定，在進行主細胞庫、工(gōng)作細胞庫、病毒種子批、對照細胞以及臨床治療用細胞需進行支原體(tǐ)檢查時，應同時進行培養法和指示細胞培養法（DNA染色法）。病毒類疫苗的病毒收獲液、原液采用培養法檢查支原體(tǐ)；必要時，亦可釆用指示細胞培養法篩選培養基。也可采用經國家藥品檢定機構認可的其他方法。在進行支原體(tǐ)檢驗時，需要建立專門的支原體(tǐ)檢驗室，以防止樣品的交叉污染。
采用傳統的方法進行支原體(tǐ)檢查，其檢測周期長，培養法至少4周，指示細胞法至少2周，對于某些藥物(wù)，病人亟需使用來挽救生(shēng)命時，傳統方法不再适用。2020版《中(zhōng)國藥典》9201 藥品微生(shēng)物(wù)檢驗替代方法驗證指導原則，USP-NF 〈1071〉 RAPID MICROBIAL TESTS FOR RELEASE OF STERILE SHORT-LIFE PRODUCTS: A RISK-BASED APPROACH（無菌短貨架期産品放(fàng)行的快速微生(shēng)物(wù)檢查法）以及EP 2.6.7（2007年首次提出用PCR技術進行支原體(tǐ)檢測的指導綱要）均提出替代檢驗方法的概念，即“在控制藥品微生(shēng)物(wù)質量中(zhōng)，微生(shēng)物(wù)實驗室出于各種原因，如成本、生(shēng)産量、快速簡便及提高藥品質量等需要而采用非藥典規定的檢驗方法（即替代方法）時，應進行替代方法的驗證，确認其應用效果優于或等同于藥典的方法。”
微生(shēng)物(wù)污染溯源調查
無菌檢測、微生(shēng)物(wù)檢測及支原體(tǐ)檢測都是培養的方法來确定樣品是否被微生(shēng)物(wù)污染。培養法更多依賴于人員(yuán)的熟練操作，操作人員(yuán)經驗不足或操作不規範易形成假陽性，樣品檢驗方法的不适用，又(yòu)易形成假陰性的結果。假陰性與假陽性的結果嚴重影響檢測結果的準确性，為患者用藥安全帶來極大(dà)隐患。
對于假陰性結果，若不能及時發現，則會導緻污染批次産品正常放(fàng)行，危及病人安全，最終導緻産品召回，品牌受損，甚至工(gōng)廠停工(gōng)或倒閉。為避免假陰性的結果，更多的是對檢驗過程規範性，人員(yuán)上崗操作能力的要求。
對于假陽性結果，如果沒有找到造成污染的根本原因，法規是禁止進行重複測試的，這就需要大(dà)量的調查以找到根源，若無法調查出根本原因，最終可能導緻該批次産品的報廢。這就要求我(wǒ)(wǒ)們對微生(shēng)物(wù)陽性檢測結果進行污染調查。
《中(zhōng)國藥典》2020版 9204 微生(shēng)物(wù)鑒定指導原則中(zhōng)指出，“大(dà)多數非無菌藥品生(shēng)産過程和部分(fēn)無菌生(shēng)産環境的風險評估中(zhōng)，對所檢出微生(shēng)物(wù)的常規特征包括菌落形态學、細胞形态學（杆狀、球狀、細胞群、孢子形成模式等）、革蘭染色或其他染色特性，及某些能夠給出鑒定結論的關鍵生(shēng)化反應（如氧化酶、過氧化氫酶和凝固酶反應）進行分(fēn)析，一(yī)般即可滿足需要”、“非無菌産品的控制菌檢查一(yī)般應達到藥典規定的水平”、“無菌試驗結果陽性、無菌生(shēng)産模拟工(gōng)藝（如培養基灌裝）失敗、環境嚴重異常事件時，對檢出的微生(shēng)物(wù)鑒定至少達到種水平，必要時需達到菌株水平”。
傳統的表型鑒定技術包括觀察菌落的形态（如大(dà)小(xiǎo)、顔色等）、染色、顯微鏡檢查以及生(shēng)化鑒定等，微生(shēng)物(wù)的表型具有一(yī)定的可變性，此外(wài)，傳統的表型鑒定技術依賴人員(yuán)經驗和培養條件，其在一(yī)些難以培養、生(shēng)長緩慢(màn)或需要特殊營養的微生(shēng)物(wù)鑒定方面的局限性大(dà)。
在應對藥品微生(shēng)物(wù)污染事件時，傳統方法已不能滿足快速分(fēn)型、準确鑒定、溯源分(fēn)析的需要。因此，以分(fēn)子生(shēng)物(wù)學為代表的基因型鑒定方法逐漸得到應用。《中(zhōng)國藥典》2020版，對無菌或微生(shēng)物(wù)檢測陽性異常結果的調查，新增了1021細菌DNA特征序列鑒定法。如細菌16SrDNA測序技術、真菌18SrDNA測序技術。
微生(shēng)物(wù)的溯源分(fēn)析中(zhōng)涉及的病原微生(shēng)物(wù)操作及鑒定，應該生(shēng)物(wù)安全二級實驗室中(zhōng)進行（P2），漢騰生(shēng)物(wù)已于2022年取得P2實驗室資(zī)質，可承接相關病原微生(shēng)物(wù)的分(fēn)離(lí)、純化、保種及鑒定等工(gōng)作。
2017年中(zhōng)國加入ICH，中(zhōng)國醫藥行業充分(fēn)利用中(zhōng)國加入ICH全面與國際接軌的時機，進一(yī)步借鑒國内外(wài)成熟的、先進的檢測技術和經驗、結合我(wǒ)(wǒ)國藥品生(shēng)産和質量控制現狀，加強通用性技術要求的制定以及國際協調和統一(yī)。
漢騰生(shēng)物(wù)QC擁有先進的自動化檢驗設備，配備了足夠的專業檢測人員(yuán)，具有重組蛋白(bái)、抗體(tǐ)、疫苗等方面的檢測能力以及相關經驗，建立了完善的生(shēng)産前、生(shēng)産中(zhōng)及生(shēng)産後産品質量控制策略。具備的檢測能力包括：
HPLC/UPLC類：SEC, CEX, 肽圖，PR-HPLC;
電(diàn)泳類：CE-SDS, cIEF, SDS-PAGE, 核酸瓊脂糖電(diàn)泳，IEF
免疫學類：ELISA活性，免疫印迹，免疫電(diàn)泳，HCP（CHO，E.coli, 人源細胞），SelectVII 殘留
生(shēng)物(wù)學活性類：細胞增殖抑制（MTT）,流式細胞法
微生(shēng)物(wù)類：微生(shēng)物(wù)限度，無菌，細菌内毒素（凝膠法，動态法）
其他常規理化類：不溶性微粒，TOC,滲透壓，密度，蛋白(bái)含量（UV, Brandford）,水分(fēn)，化學滴定反應，薄層色譜……
具備BLS-2實驗室資(zī)質，符合生(shēng)物(wù)安全的法規與要求。